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生物反應(yīng)器使用過(guò)程pH調(diào)控 時(shí)間:2022.08.08
生物培養(yǎng)過(guò)程中,pH值對(duì)微生物生長(zhǎng)具有非常明顯的影響,也是影響實(shí)驗(yàn)過(guò)程中各種酶活的重要因素。pH值對(duì)微生物的生長(zhǎng)繁殖和產(chǎn)物合成的影響有以下幾個(gè)方面:
  • ①影響酶的活性,當(dāng)pH值抑制菌體中某些酶的活性時(shí),會(huì)阻礙菌體的新陳代謝;
  • ②影響微生物細(xì)胞膜所帶電荷的狀態(tài),改變細(xì)胞膜的通透性,影響微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的排泄;
  • ③影響培養(yǎng)基中某些組分的解離,進(jìn)而微生物對(duì)這些成分的吸收;
  • ④pH值不同,往往引起菌體代謝過(guò)程的不同,使代謝產(chǎn)物的質(zhì)量和比例發(fā)生改變。

發(fā)酵過(guò)程pH變化曲線
 
在確定了實(shí)驗(yàn)各個(gè)階段所需要的最適ph之后,需要采用各種方法來(lái)控制,使整個(gè)過(guò)程在預(yù)定的ph范圍內(nèi)進(jìn)行。要使ph控制在合適的范圍內(nèi),應(yīng)首先根據(jù)不同的微生物的特性,不僅要在原始培養(yǎng)基中控制適當(dāng)?shù)膒h值,而且要在整個(gè)發(fā)酵過(guò)程中隨時(shí)檢查ph值的變化情況,并進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)控。

首先,從基礎(chǔ)培養(yǎng)基的配方考慮,通過(guò)平衡鹽類和碳源的配比,穩(wěn)定培養(yǎng)液的ph值,或加入緩沖劑(如磷酸鹽)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基初始ph值至合適范圍并使其有較強(qiáng)的緩沖能力。

發(fā)酵過(guò)程中,隨著基質(zhì)的消耗及產(chǎn)物的生成,ph值會(huì)有較大的波動(dòng)。因此,在發(fā)酵過(guò)程中也應(yīng)當(dāng)采取相應(yīng)的ph值調(diào)節(jié)和控制方法,主要有以下幾種方法:
  • ①直接補(bǔ)加酸、堿物質(zhì),如h2SO4、NaOh等。當(dāng)ph值偏離不大時(shí),使用強(qiáng)酸堿物質(zhì)容易破壞緩沖體系,而且會(huì)引起培養(yǎng)液成分發(fā)生水解,故目前已較少使用此方法。
  • ②通過(guò)調(diào)整通風(fēng)量來(lái)控制ph值。此方法主要是在加多了消泡劑的個(gè)別情況下使用,提高空氣流量可加速脂肪酸的氧化,以減少因脂肪酸積累引起的ph降低。
  • ③補(bǔ)加生理酸性或堿性鹽基質(zhì),如氨水、尿素、(Nh4)2SO4等,通過(guò)代謝調(diào)節(jié)ph值。補(bǔ)加生理性酸堿物質(zhì),既調(diào)節(jié)了發(fā)酵液的ph值,又可以補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),還能減少阻遏作用。補(bǔ)加的方式根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)情況而定,可以是直接加入、流加、多次流加等方式。
  • ④采用補(bǔ)料方式調(diào)節(jié)ph值。例如,當(dāng)ph值上升至超過(guò)最適值,意味著菌處于饑餓狀態(tài),可加糖調(diào)節(jié),糖的過(guò)量又會(huì)使ph下降。采用補(bǔ)料的方法可以同時(shí)實(shí)現(xiàn)補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)、延長(zhǎng)周期、調(diào)節(jié)ph和改變培養(yǎng)液的性質(zhì)(如黏度)等幾種目的,特別是那些對(duì)產(chǎn)物合成有阻遏作用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),通過(guò)少量多次補(bǔ)加可以避免它們對(duì)產(chǎn)物合成的阻遏作用。

 
 

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